X-Gal

X-Gal ist Substrat der ß-Galactosidase, die durch Spaltung des Substrates 5-Brom-4-chlor-3-indoxyl (X) freisetzt. Das enzymatisch abgespaltene Indoxyl wird zum unlöslichen Indigo oxidiert.

Verwendung:
X-Gal findet Verwendung in der Identifizierung von lacZ+ Bakterien, speziell zum Nachweis von ß-Galactosidase, die von rekombinanten Vektoren exprimiert wird. Als Stammlösung kann z.B. eine 20 mg/ml X-Gal-Lösung in Dimethylformamid angesetzt werden. Für die Verwendung in LB/Amp. – Platten wird diese Stammlösung 1 : 1000 (Endkonz. 20 µg/ml) oder 1 : 500 (Endkonz. 40 µg/ml) verdünnt. Das erhitzte Medium sollte dabei auf ~50°C heruntergekühlt sein. Die Menge an eingesetztem X-Gal kann reduziert werden, wenn eine X-Gal-Lösung in DMF auf die Agar-Platten (bereits mit Bakterienkolonien!) aufgesprüht wird.

Summenformel: C₁₄H₁₅BrClNO₆

Molekulargewicht: 408.61

Drehwert α²⁰D (c = 1, H₂0:DMF 1:1): -62.1°

Wassergehalt: 0.2%

Reinheit: >99%

Löslichkeit: (2%ige Lösung in DMF) klar und farblos

Stammlösung: 20 mg/ml in Dimethylformamid

Arbeitslösung: 20 oder 40 μg/ml

Transport: bei Raumtemperatur

Lagerung: bei – 20 °C

Haltbarkeit: ca. 24 Monate ab Lieferdatum