Empfehlung zum schonenden Einfrieren und Auftauen von Seren
Seren wie beispielsweise Fötales Kälberserum (FBS bzw. FKS) liefert die Seraglob gefroren in Trockeneis aus. Vor der ersten Anwendung müssen die Seren vollständig aufgetaut werden und die nicht benötigte Menge wieder eingefroren. Das Einfrieren und auch das Auftauen von Seren sollte jedoch möglichst rasch erfolgen, um das Aussalzen von Proteinen durch Bildung hoher Salzkonzentrationen in der flüssigen Phase zu verhindern.
Seraglobs empfohlene Bedingungen zum Auftauen und Einfrieren von Seren für die verschiedenen Abfüllmengen sind in den Tabellen unten aufgeführt. Häufiges Einfrieren und Auftauen lassen sich vermeiden, wenn das Serum nach dem ersten Auftauen aliquotiert wird.
Auftauen von Serum
Wärmen Sie die Flasche für ca. 30 min bei Raumtemperatur vor (oder schneller in kaltem Wasser bzw. im 18 °C Wasserbad) bis sich ein Flüssigkeitsfilm zwischen Flaschenwand und Eis gebildet hat. Dann die Flasche in ein Wasserbad (37 °C) überführen. Während des Auftauens mehrfach vorsichtig mischen – nicht schütteln, um die Schaumbildung möglichst zu vermeiden.
Auftauen
1. Auftauen des Serums von -20 °C bis zur Bildung eines Flüssigkeitsfilmes
Raumtemperatur +/- 21°C
| 100ml | 500ml | 1000ml |
| 35min | 90min | 120min |
Wasserbad bei 15-20 °C
| 100ml | 500ml | 1000ml |
| 5min | 18min | 35min |
2. Anschließende Erwärmungszeit auf 20 °C im Wasserbad
| 100ml | 500ml | 1000ml |
| 15min | 25min | 45min |
3. Anschließende Erwärmungszeit auf 37 °C im Wasserbad
| 100ml | 500ml | 1000ml |
| 20min | 35min | 40min |
Das verwendete Wasserbad sollte mindestens ein 5-10-faches Volumen im Vergleich zum Gesamtvolumen haben. Die Flaschen sollten jeweils bis zur Füllhöhe des Serums in das Wasserbad eintauchen. Während des Erwärmens regelmäßig durch drehende Bewegungen mischen
(Wichtig: Nicht schütteln, um die Schaumbildung gering zu halten).
Erneutes Einfrieren von Serum
Nach dem Auftauen sollte das Serum möglichst rasch wieder eingefroren werden. Das erneute Einfrieren des Serums generell erst nach einer Phase des Vorkühlens bei 4 °C.
Serum-Einfrierzeiten für die verschiedenen Abfüllmengen
Ohne Vorkühlung (Ausgangstemperatur ca. 20 °C)
| 100ml | 500ml | 1000ml |
| 2:30 h | 3:45 h | 4:30 h |
Mit Vorkühlung auf +4 °C
| 100ml | 500ml | 1000ml |
| 2:00 h | 3:00 h | 3:30 h |
Weitere Informationen
Hitzeinaktivierung
Seren sind undefinierte Naturprodukte. Als solche enthalten sie neben wachstumsfördernden Stoffen auch unerwünschte Komponenten. Mit der Hitzeinaktivierung werden störende Einflüsse aus dem Serum vermindert oder beseitigt.
Um den Gehalt an störenden Substanzen zu verringern ist bei vielen experimentellen Vorgehen eine Inaktivierung angebracht, wobei die sogenannte „Hitzeinativierung“ zur Anwendung kommt. Dazu wird das Serum für gewöhnlich während 30 Minuten auf +56 °C erhitzt.
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